本试剂盒专为科学研究设计,严禁用于医学诊断。以下为人黏膜素细胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA试剂盒的使用说明书。
检测原理
此试剂盒采用双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验(ELISA)技术。在预先包被Adropin(AD)抗体的微孔中,依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体。经过温育和彻底洗涤后,底物TMB被过氧化物酶催化转换为蓝色,随即在酸的作用下转化为最终的黄色。颜色深浅与样品中Adropin(AD)浓度成正相关。最后,使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作时避免任何细胞刺激。收集血液后,3000转离心10分钟,迅速小心分离血清和红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝。3000转离心30分钟后取上清液。
3. 细胞上清液:通过3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水后捣碎,进行3000转离心10分钟,取上清液。
5. 保存:如未及时检测样本,应按一次用量分装并冻存于-20℃,防止反复冻融,解冻时在室温下确保样品充分均匀解冻。
自备物品及操作注意事项
试剂盒成分:请注意:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。
试剂的准备
将20×洗涤缓冲液用蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加入19份蒸馏水。
洗板方法和操作步骤
请遵循基本操作流程以确保结果的准确性。
结果判断
通过在Excel工作表中绘制标准曲线,以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标,得到线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
免责声明
本试剂盒性能及使用的相关说明仅供参考,使用前请详细阅读。
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